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鈣檢測(cè)試劑盒鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法

更新時(shí)間:2024-04-26      點(diǎn)擊次數(shù):1279

鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)

 

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

鈣(Calcium)是一種金屬元素,常溫下呈銀白色晶體,動(dòng)物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含有碳酸鈣,檢測(cè)生命體鈣含量,主要通過(guò)檢測(cè)鈣離子濃度實(shí)現(xiàn)的,用分光度法檢測(cè)鈣較為常見(jiàn)該法需要合適的金屬指示劑或選擇性結(jié)合鈣離子后引起變色的染料化合物目前較為常用的染料有鄰-甲酚酞絡(luò)合酮(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚藍(lán)(MTB)等。

雅吉生物鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)是利用溶液中鈣離子在堿性條件下能與OCPC結(jié)合,生成紫紅色的絡(luò)合物,加入鎂離子螯合劑,去除鎂離子背景干擾,通過(guò)分光光度計(jì)檢測(cè)575nm處吸光度,根據(jù)公式計(jì)算出總鈣含量。

該法的優(yōu)點(diǎn):

1、是國(guó)際上推薦的血清鈣的常規(guī)檢測(cè)方法;

2、試劑單一,操作簡(jiǎn)便;

3、靈敏度高;

4、顯色穩(wěn)定;

5、使用樣本量小。

該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

名稱

50T

Storage

試劑(A):鈣標(biāo)準(zhǔn)(2.5mmol/L)

1ml

4℃避光

試劑(B):Ca Assay Buffer

50ml

RT避光

試劑(C):OCPC顯色液

50ml

4℃避光

試劑(D):ddH2O

10ml

RT

 

自備材料:

1、離心管或試管

2、比色杯、分光光度計(jì)

操作步驟(僅供參考):

1、制備樣品︰

①血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,可以直接用于該試劑盒的測(cè)定,-20°℃凍存,用于Ca的檢測(cè)。

②細(xì)胞或組織樣品︰取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿,低速離心取上清,-20℃凍存,用于Ca的檢測(cè)。

③高濃度樣品︰如果樣品中含有較高濃度的Ca,可以使用ddHzO稀釋,不宜使用普通蒸餾水稀釋。

2、配制Ca顯色工作液︰臨用前,取Ca Assay Buffer和OCPC顯色液等量混合,即為Ca顯色工作液,即配即用;4℃避光保存,不宜久置。

3、Ca加樣︰選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無(wú)菌聚乙烯離心管,

按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的鈣離子含量過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置平行管。

加入物(μl)

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測(cè)定管

ddH2O

0.025

-

-

鈣標(biāo)準(zhǔn)(2.5mmol/L)

-

0.025

-

待測(cè)樣本

-

-

0.025

Ca顯色工作液

2.0

2.0

2.0

4、Ca測(cè)定:混勻,室溫靜置10min ,以空白管調(diào)零,比色杯光徑1cm ,分光光度計(jì)575nm處檢測(cè),讀取標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度(即為A標(biāo)準(zhǔn),A測(cè)定)。

計(jì)算:

血清、血漿中鈣(mmol/L)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×2.5

組織中鈣(mmol/mg)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×2.5×V/待測(cè)樣品質(zhì)量(mg)

式中:

A測(cè)定=測(cè)定管的吸光度

A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度

V=組織提取液的總體積(L)

 

參考區(qū)間∶

健康成年人血清鈣濃度︰2.1~2.6mmol/L

兒童血清鈣濃度:2.25~2.67mmol/L

 

性能指標(biāo):

線性范圍:1.25~5.0mmol/L

回收率:98%~101.5%

批內(nèi)CV: 1.08%~1.60%

批間CV∶3.05%~4.12%

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