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Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)試劑

簡(jiǎn)要描述:Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)試劑,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):A3824-05
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-10-31
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:930

詳細(xì)介紹

Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)試劑該制品為雙組分的試劑,Basic Buffer Mix 包含了

反應(yīng)緩沖液、Mg

2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、凍干賦形

劑,酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、熱敏 UDG。

得益于 Bst 4.0 識(shí)別 dUTP 底物,反應(yīng)底物中不包含

dTTP,因此擴(kuò)增產(chǎn)物均為 dUTP 產(chǎn)物,在配合熱敏 UDG

的情況下,實(shí)現(xiàn)防污染性能。在實(shí)際測(cè)試中,含有 10e5 

Copies 的污染物的條件下,抑制污染擴(kuò)增。

本制品尤其適用于開(kāi)蓋的 LAMP 反應(yīng)(如試紙條檢

測(cè))、密封腔體(污染風(fēng)險(xiǎn)較高)的檢測(cè)試驗(yàn)(如定量 PCR

腔體)。試劑使用特點(diǎn):(1)Basic Buffer Mix 中不含染料,

可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料進(jìn)行熒光檢

測(cè)。(2)本試劑適用于開(kāi)蓋檢測(cè)如核酸試紙條檢測(cè)。(3)

試劑中含有凍干賦形劑,試劑可直接凍干,無(wú)需再優(yōu)化凍

干配方。

名 稱(chēng) 100T 2000T

2.5xBst4.0 Basic BufferMix1 ml  20 ml

25xBst4.0/UDG Enzymes 0.1 ml1ml x2

儲(chǔ)存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于

2-8℃,保存 1 個(gè)月。反復(fù)凍融 10 次,不影響使用。如有

白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影響

使用。

使用方法:

1. 配制 LAMP 反應(yīng)體系

2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl

25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到總體積 25 μl

10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 4~8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。

注意:如何應(yīng)用核酸試紙條進(jìn)行特異性檢測(cè),可來(lái)信咨詢(xún)。

2. 反應(yīng)體系配好后,室溫(25-37°C)放置 2min,以消

化去除潛在的核酸污染,隨后置于 65°C 進(jìn)行反應(yīng)

15~30min。

試劑凍干策略(有凍干經(jīng)驗(yàn)人員操作):

1. 配制 LAMP 凍干體系

2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl

25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

ddH2O 到體積 1.5 μl

凍干總體積 15 μl

2. 體系配制完畢后,加入 0.2 ml EP 管進(jìn)行上機(jī)凍干。

該試劑的凍干體積為 15 μl, 檢測(cè)反應(yīng)體積為 25 μl。

特別說(shuō)明:

(1)本試劑防污染原理為:熱敏 UDG 消化去除含有 dUTP

的擴(kuò)增產(chǎn)物,熱敏 UDG 在隨后 50℃以上迅速失活,并不

影響后續(xù) LAMP 擴(kuò)增。因此,本試劑無(wú)法去除采用 dTTP

擴(kuò)增的污染物,也不能消化天然的核酸底物(DNA/RNA)。

為避免擴(kuò)增氣溶膠污染,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)長(zhǎng)期使用本試劑進(jìn)行實(shí)

驗(yàn),一旦使用 dTTP 試劑擴(kuò)增后,造成實(shí)驗(yàn)室污染,采用

本試劑不會(huì)消除假陽(yáng)性擴(kuò)增。

(2)本試劑適用基于 OG 染料變色法、SYBR Green 法、

基于 Biotin/FAM 探針的核酸膠體金法(HaiGene 具有膠

體金法特異性使用策略,如需技術(shù)支持,請(qǐng)來(lái)信咨詢(xún))。

本試劑不支持 HNB、pH 顯色法。其它使用策略自行優(yōu)化

調(diào)整。

(3)基于本試劑,HaiGene 提供凍干制備服務(wù)。八聯(lián)管

起訂量 480T,凍干球起訂量 2000T。

微信圖片_20210909182641.jpg

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