維生素C(Vitamin C)又稱L-抗壞血酸，是高等靈長類動物與其他少數(shù)生物的必需營養(yǎng)素，在生物體內(nèi)維生素C是一種抗氧化劑，

為酸性己糖衍生物，是烯醇式己糖酸內(nèi)酯，保護身體免于自由基的威脅，同時也是一種輔酶，其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果

。Vc有L-型和D-型兩種異構(gòu)體，只有L-型的才具有生理功能，還原型和氧化型都有生理活性。

維生素C檢測試劑盒(菲咯啉比色法)檢測原理是在強酸和偏磷酸根離子存在條件下，鉬酸銨能與還原型維生素C反應(yīng)生成

藍色化合物，在一定濃度范圍吸光度值與濃度呈線性關(guān)系，以分光光度計760nm處檢測吸光度，獲得Vitamin C含量。該試劑盒

主要用于植物組織中的還原型維生素C(抗壞血酸)的檢測，其優(yōu)點是：1、反應(yīng)迅速；2、操作簡便；3、還原糖及其他常見的還原

物質(zhì)對實驗沒有干擾，專一性好。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml，立即取下針頭，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動秒表計時，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次，觀察管內(nèi)血液流動情況，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間，即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。

計算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使?jié)舛冗_到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使?jié)舛冗_到60μg/ml。

注意事項:

1、實驗材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20°C.

2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請小心操作。

4、TA標定液容易長菌，宜4℃保存，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用。

5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進行滴定。

6、TA滴定液含量計算公式中，V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定，并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點不易觀察，應(yīng)采用電位滴定法。

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