SD DNA Polymerase (10U/ul)試劑是一種新型的Taq DNA聚合酶，該酶具有Bst聚合酶的強(qiáng)烈的鏈置換活性和類似Taq DNA聚合酶的耐熱性。SD DNA 聚合酶可耐受90℃高溫（短暫耐受92℃），且具有5'-3'聚合酶活性、5'-3'鏈置換活性，無外切酶活性，擴(kuò)增速度2kb/min，最佳反應(yīng)溫度為70℃，這些特征使得該酶廣泛適用于熱變性PCDR (Polymerase Chain Displacement Reaction)、LAMP反應(yīng)、長片段擴(kuò)增、富含GC片段擴(kuò)增，還可用于全基因組測序（WGA）、單細(xì)胞測序和NGS建庫等領(lǐng)域。

SD DN 聚合酶在搭配Taq DNA聚合酶的組合下可進(jìn)行TaqMan探針的切割，用于qPCDR的擴(kuò)增。這種qPCDR 的新型方案將槽式PCR的高靈敏特性放置于單管、一步擴(kuò)增完成，這種檢測策略比qPCR靈敏度高10-100 倍，并且用時更短。

單位定義

1unit指在70°C條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。

應(yīng)用

等溫擴(kuò)增、LAMP、熱變性LAMP、tHDA和RCA、PCDR、全基因組測序、單細(xì)胞測序、NGS文庫構(gòu)建。

儲存

-20°C可保存2年。

SD DNA Polymerase (10U/ul)試劑恒溫擴(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。